Contoh Elektroforesis – DEFINISI Migrasi zat terlarut dalam medium cair/padat dan medan listrik Banyak senyawa dalam bentuk molekul yang mudah terionisasi seperti asam amino, protein, nukleotida, asam nukleat Senyawa bermuatan (partikel) dalam medan listrik bermuatan negatif – ) bergerak menuju anoda (+) yang bermuatan (+) akan mentransfer katoda (-)
2 2. GUNAKAN elektroforesis untuk memisahkan campuran senyawa yang berbeda dengan teknik analisis dan pemisahan yang dibahas. Pemisahan tergantung; 1) Struktur kimia 2). pH, 3). Kelompok fungsional 4). Dan berat molekulnya. Analisis ini sangat informatif tentang data. 2) Tidak diperlukan izin massal dan tinggi. 3). Sampel langsung dapat digunakan tanpa pemisahan, seperti urin dan cairan limpa.
Contoh Elektroforesis
4 Penggunaan lebih lanjut 4). Senyawa yang bersifat polar, bermuatan, atau zwitter ion Elektroforesis sangat berguna untuk diketahui; sebuah). Nasib obat yang diberikan kepada pasien atau hewan percobaan. b). Analisis elektroforesis dapat mengikuti jalur obat, c) Instrumen yang menggunakan 100 V/cm secara bertahap dapat memisahkan beberapa senyawa hanya dalam 15 menit. d). Pemisahan dilakukan dengan mengatur pH yang bervariasi dari 2 sampai 12. e) Untuk analisis kualitatif dan kuantitatif, selama ada detektor (densitometer).
Kumpulan Contoh Soal Peranan Koloid Dalam Kehidupan Sehari Hari Dan Industri
5 3. METODOLOGI Diusulkan oleh Tellius dalam penggunaan pertamanya sekitar tahun 1930 untuk memisahkan protein dalam larutan buffer yang ditempatkan dalam tabung-U. Elektroda negatif dan positif diberikan pada kedua ujungnya, setelah itu diberikan arus searah. Di bawah pengaruh medan listrik, protein akan bergerak bebas ke kutub yang berlawanan dengan muatannya. Pergerakannya berupa garis (batas), sehingga disebut cekungan bergerak, karena terjadinya peristiwa ini dalam suatu larutan disebut larutan bebas. Pergerakan juga dipengaruhi oleh berat jenis molekul, yang tentu saja sesuai dengan berat molekul.
Sampel dioleskan pada lembaran datar atau kertas yang dibasahi dengan larutan buffer, kemudian arus searah tegangan tinggi dialirkan ke kedua ujung kertas. Karena pengaruh medan listrik, terjadi pergerakan titik menuju elektroda positif dan negatif (Lehninger, dan Conway 1977). Menurut Bio-rad (1983), berdasarkan peralatan dan teknik elektroforesis dibagi menjadi elektroforesis slab, yang menggunakan pelat sebagai fase diam, dan elektroforesis mandi, yang menggunakan bahan fase diam yang ditempatkan dalam tabung. Kemudian, karena gerakan horizontal dan vertikal, itu dibagi menjadi elektroforesis vertikal dan horizontal.
1. LARUTAN BEBAS Dalam elektroforesis larutan bebas atau elektroforesis batas bergerak, migrasi ion memiliki laju dasar yang dirumuskan sebagai: didefinisikan sebagai E dalam volt, f = resolusi panjang f ‘cm, dan Uo dalam cm/detik. kemudian Vo dalam cm2, detik-1 volt1. Oleh karena itu, persamaan elektroforesis menjadi: Uo = Vo/X (1) X = E/f 1(2) Q Uo = ——— (3) Ar2
Rata-rata: Nilai Q dapat digantikan oleh Z dan E, yang masing-masing merupakan jumlah valensi dan elektron. Penulis menuliskan mobilitas partikel pada kertas elektroforesis sebagai berikut. ZE Uo = ——— (4) Ar2 Q Uo. = ————— ( 5) Ar2
Sistem Koloid Yang Medium Pendispersinya Cair Dan Fase Terdisfersinya Cair Adalah
Jika kuat medan adalah X, maka gaya pada sistem menjadi Fx, yang ditulis sebagai Fx mewakili kecepatan total menurut 1. HUKUM STOKES. faktanya hukum Stokes hanya berlaku untuk ukuran partikel 1300 Ao dan tidak berlaku untuk molekul yang mendekati ukuran molekul air. Fx = QX (6) Fx = 6 rVo (7) Q Uo=———— (8) 6 r
Ketika diuji pada amonium kuaterner dan memplot garis regresi hubungan mobilitas logaritmik pada konduktivitas tertentu; Dengan radius logaritmik ion, kita mendapatkan kemiringan -2,33. Menurut penelitian Edward dan Waldron, untuk ion organik dengan jari-jari 3-5 A0, lebih baik menggunakan rumus: Jelas bahwa mobilitas partikel sangat tergantung pada jari-jari, valensi dan jumlah muatan, dan viskositas medium. Untuk senyawa yang merupakan ion zwitter, ion dipengaruhi oleh besarnya f/fo, yang menyatakan rasio jari-jari dalam bentuk elips. ZE Uo =———— (9) 5 rw(f/fO)
Beberapa laporan Conway (1977) menunjukkan bahwa partikel dengan ukuran bervariasi dari 2.30Ao (etilamonium) hingga naftilkarboksilat (3.61A0) memiliki linearitas yang baik menurut rumus (9). Mac. Donald et al., hasil eksperimennya menggunakan air sebagai medium senyawa pada suhu 250 C memiliki nilai mobilitas yang besar yang dinyatakan sebagai: larutan. Konduktivitas larutan anorganik 0,1 M mempengaruhi mobilitas ion organik dengan penurunan 8%, U = Uo -(3, 124 X .2605 Uo (10) = 1/2CI ZI (11)
Ketika kandungan ion meningkat dari 0 menjadi 0,01m. Ini berkurang menjadi 20% ketika kandungan ion meningkat dari 0 menjadi 0,1 M. Untuk mobilitas ion divalen, itu akan turun menjadi 36%. Secara umum, media elektroforesis, kertas, bubuk kaca atau bubuk lainnya, silika gel, selulosa asetat umumnya menghasilkan muatan permukaan negatif, sedangkan permukaan bawah bermuatan positif. itu akan bergerak menuju katoda… Hasilnya adalah bahwa semua daerah (bercak), termasuk zat netral, juga akan dibawa oleh proses elektro-osmotik. Jumlah elektroforesis sangat bervariasi tergantung pada sifat bahan pendukung, pH elektrolit, sehingga jarak migrasi dapat diukur. (Gambar berikut).
Sifat Sifat Koloid
Pada saat elektroforesis sedang berlangsung dan diberikan tegangan listrik, terlihat adanya perpindahan partikel ion, baik di dalam larutan maupun pada pelat atau kertas yang digunakan sebagai media. Gerakan ini disebut arus elektroosmotik atau efek elektroosmotik. Efeknya cukup besar jika sel atau media elektroforesis berupa gasket berpori dan bersentuhan dengan elektrolit. Solusi atau media akan beradaptasi dan bahkan dapat menyebabkan muatan. Solusinya akan merasakan gerakan ke arah
Elektroda yang bermuatan berlawanan Elektroda yang bermuatan berlawanan. Mobilitas senyawa standar adalah (MA, ) dan mobilitas senyawa uji adalah MB, maka jarak (migrasi) masing-masing senyawa adalah a dan b. (Jarak dalam cm dan t dalam detik). Oleh karena itu, migrasi relatif sebenarnya adalah MB/MA = B/A. Metode ini hanya untuk diferensiasi. Dalam penggunaannya, biasanya pengukuran langsung jarak migrasi setiap sampel uji relatif terhadap senyawa standar. harga MA = a / t; dan MB = b/t.
4. Pengaruh KEPADATAN RATA-RATA Diketahui bahwa porositas akan menurunkan laju mobilitas ion, faktor yang mempengaruhinya adalah: a). keropos atau kelurusan siksaan b). Konstruksi medium (homogenitas) Ion dapat tertunda (ditahan) karena efek elektrolit dan pengisiannya. Karena elektrolit pada media berpori berada dalam keadaan statis. Bahkan diserap oleh media atau pendukungnya. d a a = jarak migrasi buffer b = jarak migrasi sampel d = jarak antara sampel dan buffer awal b
17 Untuk menguji laju absorpsi menurut Edward dan Waldon, larutan dibiarkan larut dan dapat bergerak ke arah tertentu pada kertas kromatografi. Bintik-bintik diamati pada jarak (10 cm) di belakang larutan buffer dengan mengalirkan arus searah sampai bergerak sepanjang (13 cm), kemudian jarak yang ditempuh sampel (b), dan jaraknya didapati lebih kecil dari jarak dilalui oleh larutan buffer (a). Perbedaan antara jarak migrasi larutan buffer dan sampel adalah koefisien penyerapan, yang diwakili oleh . jika a =; Jarak migrasi buffer setelah perlakuan, dan b = jarak migrasi sampel setelah perlakuan. = b/a. Metode pengukuran di atas hanya berlaku jika buffer terlarut dianggap tidak terserap.
Elektroforesis A. Pendahuluan
Jika nilai =1 dapat diabaikan, nilai ini terjadi ketika molekul ion sangat kecil, seperti molekul air. Sedangkan untuk senyawa aromatik dan heterosiklik, nilai faktor absorpsinya < 1. Parameter yang digunakan adalah asam pikrat sebagai standar anionik dan butilammonium sebagai standar kation. Rumus berikut dapat digunakan untuk menghitung mobilitas relatif mr: 5%, Uo = 1,14 X 10-3 (Z/[rw(ƒ/ƒO)] (12) Dan MR = f/(fsUs) (13)
Gugus karboksilat, yang hanya sedikit terionisasi pada pH rendah, tidak menunjukkan induksi atau penurunan mobilitas. Mobilitas asam pikrat pada pH 11,4 tidak dapat dihitung dengan menggunakan metode koefisien difusi. Waldmann-Meyer (1963) menyajikan metode untuk mengoreksi faktor penyerapan. Untuk mendeteksi proses elektroforesis. Sebagai perbandingan, dekstran yang tidak diserap oleh kertas kromatografi digunakan untuk menentukan fluks elektroforesis (slide 13).
Mobilitas basa dipengaruhi oleh pH dan pka, derajat disosiasi asam atau basa lemah dinyatakan dengan simbol persamaan ionisasi sebagai berikut: pada pH, maka persamaan harganya adalah : HB H++ B-, (14) [B-] =———— (15) [HB]+[B-] [H+][B-] Ka = —— —— (16) [HB] [HB], [H+] Dan [B-], mewakili kandungan ion atau struktur ion, hb adalah senyawa netral yang tidak terpengaruh medan listrik, jadi hanya B- yang terpengaruh, sedangkan H +, karena kecil tidak berpengaruh. Persamaan 16, Ka memiliki nilai tetap, adanya senyawa netral WB dalam analisis elektroforesis. Kecuali untuk tujuan analitis untuk menghitung pengaruh pH terhadap derajat ionisasi. Oleh karena itu, senyawa harus diubah untuk semua ion B, sehingga optimasi pH diperlukan. analit rendah (sulit). pH harus diubah untuk memaksimalkan bentuk ion B. Dibutuhkan waktu untuk menyelesaikan proses pemisahan. Jika proses pemisahan tidak tetap di perangkat, itu akan membentuk titik ekor kuantitatif. Sulit.
Rencana Pelaksanaan Pembelajaran (rpp) Sifat Sifat Koloid Dan Kegunaannya
Perbedaan mobilitas dinyatakan sebagai -u, nilai ini adalah jarak migrasi yang diukur. Rumus berikut berkaitan erat dengan pH larutan buffer: Formula 21 dikembangkan dan model mobilitas sesuai dengan perubahan pH dan perubahan ionisasi asam monoprotik dengan profil sebagai berikut: pH = pKA + LOG (19 [B -] U —— =
Alat elektroforesis, elektroforesis gel, elektroforesis dna, hb elektroforesis, elektroforesis adalah, elektroforesis horizontal, elektroforesis hemoglobin, elektroforesis koloid, elektroforesis pdf, elektroforesis agarosa, tujuan elektroforesis, elektroforesis